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南极热敏UDG酶图片
产品货号:
MT0113
中文名称:
南极热敏UDG酶
英文名称:
Heatlabile Uracil DNA Glycosylase
产品规格:
100U|500U
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是来源于嗜冷海洋细菌经大肠杆菌表达纯化的的重组蛋白。该热敏UDG酶能有效地水解单链或双链DNA上的尿嘧啶,产生的缺嘧啶位点,在高温或高pH下,极易水解断裂。该酶对RNA无活性,主要用于PCR扩增产物的防污染。大肠杆菌来源的尿嘧啶-DNA糖基化酶较为耐热,经95℃10min处理仍会残留有少量的尿嘧啶-DNA糖基化酶活性,导致含有dU碱基的PCR产物的降解。而来源于嗜冷海洋细菌的热敏UDG在50℃ 5min即完全失活,在进行PCR扩增前,在PCR混合液中添加尿嘧啶-DNA糖基化酶(热敏性),25℃10min即可消除PCR产物的残留污染,由于尿嘧啶-DNA糖基化酶(热敏性)在PCR循环的94℃变性一步便可被灭活,因此不会影响新的含dU的PCR产物。

产品应用:
· 去除单链或双链DNA中的尿嘧啶碱基;
· 去除PCR残存污染。

产品组成:
组分100U500U
热敏UDG酶(1U/μl)100μL500μL

储存条件:-20℃,可保存2年,避免反复冻融。

可选试剂:Strong Taq DNA Polymerase(货号:MT0022)

单位定义:在标准反应体系下,37℃每分钟催化60pmol尿嘧啶从含尿嘧啶的双链DNA上释放所需要的酶量为一个活性单位。

反应Buffer:本酶与绝大多数的PCR聚合酶反应缓冲液都是兼容的,但在高离子浓度(>100mM)下活性会受到抑制。

贮存液:20mM Tris-HCl,50mM NaCl,1mM DTT,50% Glycerol,0.1% (w/v) Triton X-100,pH7.5。

热失活:50℃,10min。

使用举例:
1.配制反应体系:
加入物加入量
Strong Taq DNA Polymerase0.5μL
dNTP Mixture(2.5mM each)2μL
10×Hi PCR Buffer5μL
Heatlabile UDG(1U/μl)1μL
Primers (10μM each)1μL
Template DNA10ng~1μg
DEPC-treated Water至50μL

2.25℃孵育10min。
3.正常启动PCR程序。
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